腦指蛋白(Brain Finger Protein), Znf179,對突觸內運輸的角色及分子機制研究

研究計畫: A - 政府部門b - 科技部

專案詳細資料

說明

核內體對膜運輸相當重要,透過控制突觸前突觸小泡及突觸後神經傳導物質受體的循環,對調控 突觸強度及突觸可塑性扮演相當重要的角色。腦指蛋白Znf179 又稱為Rnf112,被發現可表現在細胞 膜周圍及核內體並影響核內體的動態變化,包含我們實驗室在內的先前研究中發現,Znf179 基因剔除 小鼠其配對刺激增益(paired-pulse facilitation)與長期增益(long-term potentiation)現象都受到損害,顯示 Znf179 可能透過未知的機制影響突觸膜運輸並進而影響神經細胞突觸前與突觸後的功能。利用免疫沉 澱法及質譜分析,我們初步的研究結果顯示,許多在突觸的內噬作用、胞吐作用、微管動態變化及突 觸傳導扮演重要功能的蛋白質,如STXBP1 (syntaxin binding protein 1)、drebrin、Rab11fip5 (RAB11 family interacting protein 5)及kinesin superfamily proteins (KIFs)等都被發現存在於Znf179 的免疫沉澱物 中,我們將進一步利用共同免疫沉澱及西方轉漬實驗來確認這些蛋白與Znf179 的結合關係,利用GST pull-down 及體外泛素化實驗,我們也將確認Znf179 是否直接與這些蛋白結合,並是否造成這些蛋白 的泛素化。利用FM 染劑我們將分析並比較,正常小鼠與Znf179 基因剔除小鼠神經細胞的突觸小泡胞 吐作用速率的差別,也會利用生化萃取方式分離突觸後緻密區蛋白,偵測此區域神經傳導物質受體在 正常小鼠與Znf179 基因剔除小鼠腦中誘導長期增益前後的變化,來探討Znf179 是否影響突觸後神經 傳導物質受體運輸的作用。此外可能的Znf179 結合蛋白與其本身的反應蛋白之間的結合是否受到 Znf179 的影響也將做進一步的實驗確認。透過深入的探討Znf179 對突觸功能的影響及可能的作用機 制,將有助於我們對突觸運輸及突觸可塑性機制的更進一步瞭解。
狀態已完成
有效的開始/結束日期8/1/177/31/18

Keywords

  • 腦指蛋白
  • 突觸內運輸
  • 突觸可塑性