山藥儲藏性蛋白質功能性月生月太之延緩衰老功能評估與機制探討(3/3)

研究計畫: A - 政府部門b - 科技部

專案詳細資料

說明

山藥中含有豐富的儲藏性蛋白dioscorin。本研究室證明山藥的儲藏性蛋白dioscorin及酵素水解物具有抗氧化的功能,惟水解後有活性的胜肽卻沒有進一步被鑑定及探討。在預試驗中發現,以D-半乳糖皮下注射十週誘發老化模式中,餵食六週dioscorin能有效提高小鼠體內抗氧化指標成分與降低脂質過氧化指標成分。因此,本研究計畫以三年時間,以電腦模擬胃蛋白酶水解dioscorin,合成並篩選具抗氧化潛力的胜肽片段,以動物模式評估抗氧化潛力並利用體學技術探討可能的機制。第一年計畫,以模擬胃蛋白酶水解dioscorin,經微波固相合成候選胜肽,探討一系列抗氧化實驗(包括氧化自由基吸收能力評估、超氧自由基清除、氫氧自由基清除、抗低密度脂蛋白氧化、血球保護能力試驗、抑制蛋白質糖化試驗)及對於甲基乙二醛(methylglyoxal, MGO)或模式蛋白質與MGO反應產生之糖化最終產物(advanced glycation end products, AGEs)所誘發內皮細胞凋亡的保護作用及機制探討及MPP+誘發神經細胞的凋亡保護作用及機制探討,篩選出的活性胜肽。第二年計畫,將建立D-半乳糖皮下注射誘發老化的老鼠模式及MPTP誘導巴金森氏症的小鼠模式,以水迷宮、被動迴避試驗及滾輪試驗的動物行為模式來評估評估所篩選出潛力的抗氧化胜肽對於動物模式中學習記憶及神經衰退的狀態;並分析血清及組織中的自由基、抗氧化能力、脂質氧化程度及AGEs含量。除上述分析,另外對於MPTP誘導神經退化疾病的小鼠,分析腦部多巴胺、iNOS含量及組織免液染色來評估神經保護作用。為了瞭解整體作用機制及於體內的吸收效率,第三年計劃,將以蛋白質體學及基因體學探討MPTP誘導巴金森氏症的小鼠及活性胜肽餵食的巴金森氏症小鼠的腦部,其蛋白質及基因的改變;另外一方面以Caco-2細胞模擬分析活性胜肽於小腸中的吸收並以LC/MS/MS進行吸收效率評估。這些in vitro及in vivo數據將做為未來開發健食品的參考。
狀態已完成
有效的開始/結束日期8/1/157/31/16

Keywords

  • 山藥
  • 儲藏性蛋白
  • 抗氧化
  • 抗老化
  • 電腦模擬胃蛋白酶水解
  • 活性胜肽