芳香烴碳水化合物協同劑(3MC)對腦血管完整性及通透性之改變,與使用史達汀衍生物的干預治療作用

研究計畫: A - 政府部門b - 科技部

專案詳細資料

說明

血管內皮細胞與胞外間質(ECM)形成附著連結,其交互關係為維持血管內皮屏障(BBB)完整性 之重要元素。我們先前已發表的研究顯示,3MC 透過增進芳香烴受體(AhR)依賴型的基因轉錄 表達及抑制負回饋路徑FAK/p190RhoGAP,增加RhoA 表現量與活性。其引起張力纖維絲和焦點 黏著複合體(FAC)的形成。在此,我們將延伸先前的研究工作探討3MC 活化RhoA 後,對1) PKCδ/GSK3/-catenin/ECF-LEF 之調控、2) PI3K/AKT 路徑對p21/p27 在細胞內分佈、及eNOS 活性之影響、3) 視網膜母細胞瘤蛋白和去乙醯基酵素(RB-HDAC1)交互作用影響,更進一步評 估這些結果對血管內皮細胞完整性及可塑性的改變。初步結果顯示:3MC 增加RhoA 活性,進 而增加PTEN/PKCδ 活性,因而抑制ECM 及其受體的表現。相反地,活化RhoA 降低PI3K/AKT 活性而導致p27 保留在細胞核中及降低eNOS 活性。因此,3MC 是否影響血管內皮細胞功能及 可塑性將藉由腦微血管內皮細胞(CMVEC)與星狀膠質細胞共同培養及動物體內BBB 的完整性進 行評估。此外,3MC 也增加RB 及HDAC1 表現量、活性及入核作用,是否與降低組蛋白(H3/H4) 乙醯化有所關連。我們將探討其增加RB/HDAC1 蛋白表現量、活化作用而減少RB-E2F1 複合體 形成,所調控相關下游分子表現之機轉(如CDK2 和CDK4 或其他抗血管生成分子等),及對CMVEC 功能之影響。因此,第一年研究重點,釐清CMVEC 處理3MC 後ECM 的減少是否與-catenin 走 向蛋白酶體降解路徑,導致降低TCF/LEF 訊息調控路徑有關,及其上游是否與RhoA/PTEN/PKCδ 活化有關。第二年,ECM 受體表現減少對CMVEC 可塑性及通透性的影響將在細胞及動物實驗中 評估。第三年,3MC 增加RhoA 活性,使PI3K/AKT 活性降低對p21/p27 細胞內分佈之影響與eNOS 二聚體化/活化之分子機制作探討。其在3MC 調控CMVEC 抗增殖與抗遷移作用所扮演角色將利 用RhoA 活性的獲得或失去來證實(例如表達持續活化態RhoA、顯性抑制態RhoA 載體或RhoA 抑 制劑)。第四年,3MC 對於外顯組蛋白修飾作用的影響是否與增加RB 活性及HDAC1 與E2F1 複 合體結合相關,以降低CMVEC 細胞週期及遷移相關分子之表達。初步結果顯示,上述這些現象 是由AhR 或是RhoA 活性所調控。辛伐他汀與普伐他汀透過抑制HMG-CoA 中間產物mevalonate 轉換成geranylgeranyl pyrophosphate 抑制RhoA 活性。因此,史達汀衍生物將做為3MC 導致內皮 功能損傷之治療對策,藉由抑制RhoA 活性發揮其保護作用,維持血管內皮細胞的完整性和功能。 綜合上述,釐清AhR 協同劑分子運作模式,不僅展露AhR 在CMVEC 生理上扮演的角色,並且提 供新的分子基礎以發展治療目標,來阻斷外源性化學物透過AhR 引起的腦血管損傷。
狀態已完成
有效的開始/結束日期8/1/129/30/13