不同APC基因狀態大腸直腸癌患者藥物治療之抗藥性機轉研究-合併 tetrac-與 cetuximab-誘導抑制APC基因功能異常之大腸直腸癌細胞增生(1/3)

研究計畫: A - 政府部門b - 科技部

專案詳細資料

說明

臨床上應用單株抗體爾必得舒(學名 cetuximab,為 EGFR 抗體)可抑制癌細胞生長。 而 integrin αvβ3 的拮抗劑 tetraiodothyroacetic acid (tetrac)也有類似效果。於灌流式細胞培 養系統 (perfusion bellows cell culture system)內,合併 tetrac 與 cetuximab 處理三陰性乳 癌細胞,比起單獨使用,更能抑制癌細胞增生。Adenomatous polyposis coli (APC)、K-ras 與 β-catenin 基因突變,被認為是早期大腸直腸癌化的指標。然而,這之中的關聯仍不清 楚。我們期許本計畫能找出 K-ras,APC 和 β–catenin 的相互關係,並利用合併使用兩 藥劑處理,透過不同的機轉來阻止大腸直腸癌細胞的增生,創造出嶄新的治療方式。 本計畫預計研究: (a)合併 tetrac 或單獨使用 cetuximab 處理 APC 基因功能異常之 大腸直腸癌細胞所引發之訊息傳遞路徑與基因表現;(b) tetrac 強化 cetuximab 誘導抗細 胞增生的機轉;(c) 利用灌流式細胞培養系統 (perfusion bellows cell culture system) 建構 cetuximab 與 tetrac 的藥物動力學模式;(d) 利用異體移植人類大腸直腸癌細胞至小鼠 實驗確認(a)與(c)的現象,並利用 (c) 的研究結果確認藥物使用劑量。 本計畫目標為: 1. 利用 tetrac 提升 cetuximab 誘導抑制 APC 基因功能異常之人類大腸直腸癌細胞增生 的效能;2. 建構 tetrac 與 cetuximab 所誘導對抗 APC 基因功能異常之大腸直腸癌細胞增 生之藥物動力學模式(PD);3. 利用異體移植鼠,驗證 tetrac 於 cetuximab 誘導之 APC 基因功能異常之大腸直腸癌細胞凋亡的潛力 我們將利用下列實驗方法來佐證目標: (i) 利用 siRNA 抑制 integrin αvβ3 表現來確認 integrin αvβ3 於 cetuximab 所誘導的抗細 胞增生中所扮演的角色;(ii) 利用 RT-PCR,免疫染色和 TUNEL assay 檢測 cetuximab 單獨或合併 tetrac處理之細胞中 integrin αvβ3和訊號蛋白;(iii) 在抑制 CBY1表現後 (目 標 1 與 2),利用 RT-PCR、免疫染色和染色質體免疫沈澱分析驗證其與 PTEN 和 HIF-1 α的表現程度與交互作用。(iv) 利用 Affymetrix arrays 確認 tatrac 單獨或合併 cetuximab 處理之細胞的基因表現特徵;(v) 利用灌流式細胞培養系統確認 cetuximab、tetrac、 cetuximab 合併 tetrac 之藥物動力學(目標 2),以備為 (vi) 異體移植鼠研究來確認 cetuximab 於 tetrac 所誘導的抑制細胞增生之影響 (目標 3)。 透過了解 cetuximab 與 tetrac 合併或單獨使用所誘導的抗細胞增生機轉,期許能建 構針對 APC 基因功能狀態異常之大腸直腸癌嶄新的治療方式。
狀態已完成
有效的開始/結束日期8/1/147/31/15

Keywords

  • tetrac
  • 爾必得舒
  • 抗增生
  • 大腸直腸癌
  • 合併治療
  • 大腸息肉症(APC)